5064-8267安捷倫ZORBAX 300SB-C18色譜柱

更新時間： 2025-02-08
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5064-8267 ZORBAX 300SB-C18，3.5µm, 0.3 x 150 mm

應用一種新的毛細管 HPLC-ICP-MS 接口進
行富硒酵母中含硒蛋白的鑒定
飲食是人體硒 (Se) 的主要來源，該必需元素的攝入主要取決于食品中的硒含量
和所消耗的食物量。由于許多國家農產品中硒的含量很低，所以硒缺乏成為了一
個值得注意的問題。人們已經開發了許多提高人體硒攝入的食品添加策略；富硒
酵母就是人和動物添加劑最常用的硒來源之一。
評估硒是否充分不僅需要了解硒總含量，而且還要了解各種形態硒的含量。但
到目前為止，大部分研究都僅限于針對占總硒 12-20% 左右的水溶性酵母成分。
酵母的不溶性硒組分很多尚未被發現，表征這類主要組分的工作非常少，其中
Chassaigne 和 Chéry [1] 曾研究過酵母蛋白的硒特異性激光消融 (LA-) ICP-MS指紋譜， Tastet 等人 [2] 曾用實驗室自制的 nanoHPLCICP-MS 接口對富硒多肽進行了硒選擇性檢測。在常規方法
中，通過測定總硒代蛋氨酸含量（含硒蛋白含量）來評估
富硒酵母的質量。
本研究提出了一個 ICP-MS 輔助的蛋白質組學方法，用于
鑒定富硒酵母中的含硒蛋白。采用雙向凝膠電泳分離不溶
性含硒蛋白。使用 LA-ICP-MS 找出分離后的含硒蛋白斑
點，經切割后，用胰蛋白酶消化；所得多肽通過毛細管
HPLC-ICP-MS 進行分析，然后用電噴霧離子化 (ESI-) MS/MS
進行表征，鑒定出富硒酵母中主要的含硒蛋白——甘油
醛-3-磷酸酯脫氫酶-3。由于胰蛋白酶裂解產物量非常少，
所以需要使用毛細管色譜

5064-8267安捷倫ZORBAX 300SB-C18色譜柱

文建立了有效的 ICP-MS 輔助蛋白質組學方法，用于鑒
定市售富硒酵母樣品不溶性硒組分中的含硒蛋白。采用雙
向凝膠電泳分離含硒蛋白，并用胰蛋白酶進行裂解。采用
LA-ICP-MS、毛細管 HPLC-ICP-MS 和 ESI MS/MS 組合
方法對裂解產物進行鑒定、分析和表征。由于胰酶裂解產
物量非常少，所以需要使用毛細管色譜。采用本方法鑒定
出了甘油醛-3-磷酸酯脫氫酶-3，這是富硒酵母中的主要含
硒蛋白。證明由于蛋白鏈中的硫-硒取代途徑而引入硒，存
在于蛋氨酸 (M) 和半胱氨酸 (C) 殘基中，后者在酵母樣品
中首次發現